Évaluation du dosage Immunochromatographique Binax NOW pour la détection d’antigène urinaire de Streptococcus pneumoniae dans une étude prospective sur la pneumonie acquise dans la communauté en Espagne

Nous avons évalué le test de membrane immunochromatographique rapide Binax NOW ICT pour la détection de l’antigène urinaire Streptococcus pneumoniae dans une étude prospective populationnelle d’adultes atteints de pneumonie communautaire. CAP ICT a été réalisé avec des échantillons d’urine obtenus chez% des patients enrôlés. des patients atteints de pneumonie pneumococcique Les résultats du test étaient plus fréquemment positifs pour les patients qui n’avaient pas reçu d’antibiotiques avant de tester% vs%; P = Seuls% des échantillons prélevés chez des patients atteints de pneumonie non pneumococcique ont donné un résultat positif Parmi les patients ayant une pneumonie sans pathogène identifié, l’antigène a été détecté en% Avec les critères microbiologiques conventionnels utilisés comme «étalon-or», le test avait une sensibilité de % et une spécificité de% Test des échantillons d’urine concentrée avec les TIC peut être une technique utile pour le diagnostic rapide de la pneumonie pneumococcique chez les adultes avec CAP

Streptococcus pneumoniae est reconnu depuis longtemps comme l’une des causes les plus fréquentes de pneumonie communautaire. Cependant, le diagnostic microbien de la pneumonie pneumococcique reste problématique Un nouveau test immunochromatographique rapide sur membrane, le test Binax NOW S pneumoniae développé pour la détection des antigènes de S pneumoniae dans les échantillons d’urine Contrairement à d’autres tests moins sensibles qui détectent les antigènes capsulaires, ce test rapide détecte le polysaccharide S pneumoniae, présent dans la paroi cellulaire et commun à tous les sérotypes. suggèrent que les TIC peuvent avoir une bonne sensibilité et spécificité , afin de déterminer la performance réelle du test pour le diagnostic de la pneumonie pneumococcique, de grandes études qui comprennent une série consécutive de patients avec un large spectre de CAP devrait idéalement être réalisée A notre connaissance, jusqu’à présent, une seule étude de ce type, Murdoch et al , a été réalisée. Dans cette étude, le test a révélé Une sensibilité élevée a été observée chez les patients dont les hémocultures étaient positives pour S pneumoniae. Cependant, seuls les patients ayant reçu une PAC et ayant été admis à l’hôpital ont été inclus, et les résultats de l’essai étaient limités chez les patients atteints de pneumonie non pneumococcique. La signification des infections avec un résultat ICT positif qui n’avait pas d’autres diagnostics étiologiques n’a pas été étudiée L’interprétation de ces cas peut être critique pour déterminer la valeur prédictive du test. Le but de ce travail était d’évaluer l’utilité des TIC dans un grande étude prospective de la PAC Dans cette étude, des patients avec un large spectre clinique et microbien de CAP ont été utilisés pour évaluer le test, et les caractéristiques cliniques de l’infection qui ont fourni un résultat antigénique positif sans autre pathogène identifié ont été soigneusement examinées

Patients et méthodes

Le stade V comprend les patients ayant le pronostic le plus défavorable, et le stade V inclut ceux dont le pronostic est le moins favorable. Études microbiologiques L’étude diagnostique en laboratoire comprenait des échantillons d’expectoration pour coloration de Gram et culture, des échantillons de sang pour culture, un échantillon urinaire pour détection de Legionella pneumophila urinaire antigène et échantillons sériques obtenus pendant la phase aiguë de la maladie et – semaines plus tard pour les tests sérologiques. Les échantillons d’expectoration ont été obtenus chez des patients atteints de toux productive Samples du lundi au samedi de AM à PM traités h Échantillons obtenus après PM et ceux obtenus le dimanche ont été réfrigérés jusqu’au traitement Nous avons évalué uniquement des échantillons qualifiés, tels que définis selon les critères standards présence de & gt; WBC et & lt; Un test immunochromatographique Binax a été utilisé pour détecter l’antigène soluble du sérogroupe L pneumophila dans l’urine. Un test de fixation du complément a été réalisé pour détecter des anticorps dirigés contre Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophilia psittaci, Coxiella burnetii, les virus grippaux A et B , virus parainfluenza, virus respiratoire syncytial et adénovirus Un test d’immunofluorescence indirecte a été utilisé pour détecter les anticorps dirigés contre L pneumophila, et un test de microimmunofluorescence a été utilisé pour détecter les anticorps contre Chlamydophilia pneumoniaeCritères pour le diagnostic étiologique Les critères suivants ont été utilisés pour classer un cas de pneumonie étant d’étiologie connue: pour M pneumoniae, C psittaci, C burnetii, virus grippaux A et B, virus parainfluenza, virus respiratoire syncytial et adénovirus, une augmentation d’un facteur ⩾ des anticorps, telle que déterminée par le test de fixation du complément; pour C pneumoniae, augmentation des titres d’anticorps en ⩾: ou présence d’anticorps IgM ⩾:; pour L pneumophila, l’isolement de l’organisme à partir d’échantillons respiratoires, l’antigène Legionella détecté dans l’urine, ou une augmentation de ⩾ fois du titre d’anticorps par immunofluorescence; S pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus et autres bactéries, y compris les entérobactéries à Gram négatif, isolement du pathogène à partir d’échantillons de sang ou de liquide pleural ou isolement de l’organisme prédominant à partir d’un échantillon d’expectoration qualifié. les critères diagnostiques étiologiques décrits ci-dessus ont été considérés comme ayant une pneumonie d’étiologie inconnue. Des échantillons d’urine ont été obtenus, congelés à-° C jusqu’à leur utilisation et décongelés immédiatement avant d’être testés. Les échantillons ont été bouillis pendant min et centrifugés à procédure qui a été utilisée pour prévenir les réactions non spécifiques L’antigène présent dans l’urine était concentré – par ultrafiltration sélective Vivapore, MW; Vivascience Le temps nécessaire pour concentrer l’urine par ultrafiltration sélective était – h, en fonction des caractéristiques physiques de chaque échantillon. Le test d’antigène urinaire Binax NOW S pneumoniae a été effectué conformément aux instructions du fabricant. Un écouvillon a été trempé dans l’échantillon d’urine et placé sur une membrane de nitrocellulose contenant des anticorps de lapin contre S pneumoniae conjugué à des particules d’or colloïdal. Les résultats ont été lus visuellement en min. Le résultat du test a été interprété par la présence ou l’absence de lignes visuellement roses à violet. mode aveugle, sans connaître les résultats d’autres études microbiologiques Selon des études antérieures , seules les lectures positives moyennes ou très intensives, par rapport à la ligne de contrôle positif, ont été considérées comme des résultats positifs; une lecture faiblement positive a été considérée comme un résultat négatif Le test n’a pas donné de résultats non interprétables Le résultat du test d’antigène urinaire n’était pas disponible pour les médecins avant l’antibiothérapie initialeAnalyse statistique Sur la base des critères décrits ci-dessus, le diagnostic final a été utilisé comme norme pour déterminer l’utilité diagnostique du test en termes de sensibilité, de spécificité et de valeurs prédictives positives et négatives Pour les besoins des calculs, les patients ont été classés en groupes: ceux atteints de pneumonie pneumococcique et ceux atteints de pneumonie non pneumococcique, à l’exclusion des patients avec pneumonie d’étiologie inconnue Les caractéristiques des patients atteints de pneumonie pneumococcique diagnostiquée par des méthodes conventionnelles ont été comparées à celles des patients ayant une pneumonie d’étiologie inconnue avec un résultat positif au test d’antigène urinaire pneumococcique Nous avons utilisé le test or ou, le cas échéant, le test exact de Fisher pour comparer les proportions de variables qualitatives, et nous avons utilisé le test U de Mann-Whitney ou le test t de Student pour comparer les variables quantitatives. La valeur p de P a été considérée comme statistiquement significative. La précision statistique de plusieurs indices de test a été déterminée au moyen de SPSS, version SPSS

Résultats

Parmi les patients qui présentaient des signes et des symptômes compatibles avec la pneumonie, on a constaté qu’ils ne présentaient pas de PAC, laissant des patients dans la cohorte de l’étude. Il y avait des hommes et des femmes avec une moyenne d’âge de quelques années. traitement antibiotique avant hospitalisation Répartition des patients selon le système de score de Fine était la suivante: I / II,%; III,%; IV,%; et V,% Un total de patients% ont été admis à l’hôpital, dont% ont dû être admis à l’unité de soins intensifs. Les autres patients ont été sortis du service des urgences et traités en ambulatoire. sérum des patients%, sérum de suivi des patients%, urine des patients%, et crachats des patients% agents étiologiques identifiés Sur la base des critères microbiologiques conventionnels, des agents étiologiques ont été trouvés chez les patients% Au total de pathogènes bactériens, agents pathogènes atypiques, et les agents pathogènes viraux ont été détectés Les agents étiologiques les plus courants étaient M pneumoniae%, S pneumoniae%, L pneumophila%, C pneumoniae% et virus influenza% Pour% des patients, l’infection était considérée comme mixte sur la base des critères diagnostiques établis. des patients, l’étiologie microbienne restait inconnue après l’étude diagnostique microbiologique non invasive conventionnelleRésultats of the S pneumo Test d’antigène niaeurinaire Le test d’antigène urinaire S pneumoniae a été réalisé pour% d’échantillons d’urine. Le test n’a pas été réalisé pour les patients%; patients dans le groupe étiologie inconnue et patients dans le groupe avec une étiologie autre que S pneumoniae car un échantillon d’urine n’était pas disponible Le résultat ICT était positif pour les patients% Le résultat du test était plus fréquemment positif pour les patients n’ayant pas reçu d’antibiotiques avant admission. %] des patients chez lesquels les données étaient disponibles que chez ceux qui avaient déjà été traités [%] des patients; P = Les distributions des diagnostics finaux et des résultats ICT sont présentées dans le tableau. L’antigène pneumococcique a été détecté chez% des patients atteints de pneumonie pneumococcique; les résultats étaient positifs pour% de patients bactériémiques et pour% de patients non-bactériémiques. Chez les patients atteints de pneumonie pneumococcique qui ont eu un résultat positif, le délai médian entre l’apparition des symptômes de la pneumonie et le moment du test était de plusieurs jours. alors que, pour les patients dont les résultats étaient faussement négatifs, le test a été effectué une médiane de quelques jours, – jours après le début des symptômes P = Un patient du groupe avec des résultats faussement négatifs avait reçu un traitement antibiotique avant de subir un test [%] les patients; aucun patient du groupe ayant présenté une pneumonie à pneumocoque et des résultats positifs aux tests d’antigène urinaire n’avaient reçu un traitement antibiotique antérieur

Tableau View largeDownload slideRésultats du test de l’antigène urinaire pour la détection de Streptococcus pneumoniae chez des patients atteints de pneumonie pneumococcique diagnostiquée par des méthodes conventionnelles, pneumonie non pneumococcique et pneumonie d’étiologie inconnueTable View largeTélécharger les résultats du test de l’antigène urinaire pour la détection de Streptococcus pneumoniae chez les patients Une pneumonie pneumococcique diagnostiquée par des méthodes conventionnelles, une pneumonie non pneumococcique et une pneumonie d’étiologie inconnueSixteen% des échantillons d’urine obtenus de patients atteints de pneumonie non pneumococcique ont donné un résultat positif Bien que certains de ces cas puissent effectivement représenter des infections mixtes, ils ont été considérés comme faux positifs. Déterminer l’utilité diagnostique du test Le tableau montre les données cliniques et de laboratoire des patients avec ces résultats faussement positifs. Le test avait une sensibilité de%% CI, -, une spécificité de%% CI, -, une valeur prédictive positive de%% CI, -, et un pré négatif valeur indicative de%% IC, – Il y avait des échantillons d’urine avec une lecture faiblement positive dans un cas de pneumonie pneumococcique bactériémique et dans des cas de pneumonie non pneumococcique Comme indiqué précédemment, ces échantillons étaient considérés comme négatifs Si ces échantillons avaient été considérés comme positifs, test aurait eu une sensibilité de%% CI, -, une spécificité de%% CI, -, une valeur prédictive positive de%% CI, -, et une valeur prédictive négative de%% CI, – Nous n’avons pas trouvé de différences dans la valeur prédictive du test selon l’âge, le sexe, ou les données de classification de Fine non montrées Enfin, pour les patients ayant une pneumonie sans pathogène identifié, l’antigène a été détecté dans% des échantillons d’urine testés Les principales caractéristiques de ces patients comparées aux les patients ayant une pneumonie à pneumocoque diagnostiquée par des méthodes conventionnelles sont présentés dans le tableau Aucune différence significative n’a été notée entre les deux groupes

Vue de la table grandTélécharger la diapositiveRésumé des données cliniques et de laboratoire pour les cas ayant eu des résultats faussement positifs du test d’antigène urinaire Streptococcus pneumoniaeTable View largeDisque de téléchargementRésumé des données cliniques et de laboratoire pour les cas de résultats faussement positifs du test d’antigène urinaire Streptococcus pneumoniae

Tableau View largeDownload slideCaractéristiques principales des patients atteints de pneumonie, résultats positifs aux tests d’antigène urinaire et aucun pathogène identifié par rapport aux patients ayant une pneumonie pneumococcique diagnostiquée par des méthodes conventionnellesTable View largeTélécharger les caractéristiques principales des patients atteints de pneumonie, résultats d’analyse d’antigène urinaire positif, et non pathogène identifié par rapport aux patients ayant une pneumonie à pneumocoque diagnostiquée au moyen de méthodes conventionnelles

Discussion

aucun autre pathogène identifié comme pneumonie à pneumocoque vrai, la sensibilité réelle et la valeur prédictive positive des TIC sont beaucoup plus élevées que nos estimations Lorsque ces cas sont ajoutés au groupe avec un pathogène microbien identifié, le pourcentage de patients chez qui un diagnostic étiologique a été atteint dans notre cohorte augmente de% à%, et la fréquence relative de S pneumoniae augmente de% à% de tous les cas de pneumonie, ce qui en fait l’organisme le plus fréquemment identifié pour avoir causé la PPA Bien que les TIC détectent probablement des pneumonies pneumococciques non diagnostiquées procédures, nos résultats ont également confirmé qu’une proportion significative de patients atteints de pneumonie à pneumocoque non équivoque sont manquées par le test Il y avait des résultats faux négatifs sur les TIC chez les patients atteints de pneumonie pneumococcique bactériémique Dans un de ces cas, l’échantillon d’urine donnait une lecture faiblement positive ; dans l’autre, une lecture négative a été obtenue. La proportion de résultats faussement négatifs détectés chez les patients bactériémiques de notre cohorte est similaire à celle trouvée dans les études précédentes Les raisons de ces résultats faux négatifs sont inconnues. entre l’apparition des symptômes et la collecte des échantillons d’urine avait tendance à être plus long que le délai pour les patients avec des résultats vraiment positifs, mais la différence n’a pas atteint la signification statistique dans notre étude. concernant le manque de spécificité des TIC chez les nourrissons et les enfants , mais il semble y avoir moins de problèmes pour les adultes En fait, les données disponibles, y compris les résultats de la présente étude, suggèrent que ce test présente une spécificité élevée chez les adultes. , même après concentration de l’antigène présent dans l’urine par ultrafiltration sélective Dans notre étude, seulement% d’échantillons d’urine prélevés chez des patients non atteints de pneumococcie La pneumonie a donné des résultats positifs Un nouveau défi auquel sont confrontées les nouvelles techniques de laboratoire utilisées pour le diagnostic de la pneumonie pneumococcique est l’absence de référence pour évaluer la spécificité. La signification de l’étiologie mixte de la PAC est de plus en plus appréciée dans la littérature. méthodes de diagnostic pour identifier les agents pathogènes atypiques et viraux Par conséquent, certains des soi-disant résultats faussement positifs des TIC notés dans notre étude peuvent avoir été causés par des infections mixtes Si c’était le cas, la spécificité et la valeur prédictive positive Bien que notre étude n’ait pas abordé l’impact clinique des résultats des tests, nous pensons qu’ils pourraient avoir des implications pour l’antibiothérapie, en particulier dans les zones géographiques où le traitement de la PAC est compliqué par le nombre croissant de souches résistantes à la pénicilline et céphalosporines de troisième génération Parce que le sp l’efficacité est très bonne, un résultat positif suggère le diagnostic de pneumonie pneumococcique et devrait être utile pour orienter plus précisément le choix initial d’antibiotiques pour la PAC. Cependant, la sensibilité de l’essai n’est pas suffisante pour exclure une infection pneumococcique et, par conséquent, un résultat négatif. peut être moins utile Un avantage majeur des TIC par rapport aux procédures microbiologiques conventionnelles pour le diagnostic de la pneumonie à pneumocoque est sa rapidité et sa simplicité. Pour les échantillons d’urine non concentrés, le test peut être réalisé en moins d’une demi-heure de traitement. un outil de diagnostic de chevet pour les cliniciens Cependant, la concentration d’urine nécessite des travaux de laboratoire supplémentaires et la procédure complète peut prendre jusqu’à h dans certains cas. Malheureusement, nous n’avons pas évalué le rendement du test sans concentrer les échantillons d’urine. comparant les résultats des tests avant et après la concentration ont fourni controverse res ults Bien que Marcos et al aient rapporté que la concentration de l’urine améliore significativement la sensibilité, Murdoch et al ont testé des échantillons d’urine prélevés sur des patients atteints de pneumonie avant et après la concentration d’urine. en considération le coût, la simplicité et la rapidité, la détection de cas supplémentaires peut ne pas justifier la concentration systématique des échantillons d’urine par les laboratoires de diagnostic. Par conséquent, lorsque le test est utilisé en routine, sa sensibilité peut être inférieure au% rapporté dans cette étude. Nous avons constaté que les TIC peuvent être une technique utile pour la détection de l’antigène S pneumoniae dans des échantillons d’urine concentrés et peuvent augmenter le rendement diagnostique des pneumocoques chez les patients atteints de PAC. Cependant, malgré ses avantages, le test peut ne pas être suffisamment sensible de nombreux patients atteints de PAC D’autres études sont nécessaires pour établir l’impact clinique de ce test et déterminer hermine si le test est rentable dans la pratique clinique