Un vaccin anti-VIH polyprotéine avec adjuvant induit des réponses de lymphocytes T CD croisées polyfonctionnelles chez des volontaires séronégatifs

Contexte Cette étude de phase I / II partiellement aveugle, randomisée et dose-dépendante a évalué l’innocuité et l’immunogénicité d’un nouveau vaccin anti-VIH de type virus de l’immunodéficience humaine constitué d’une protéine recombinante F contenant des antigènes du clade B du VIH Gag p, Pol transcriptase inverse , Nef, et Gag p adjuvant avec AS chez les volontaires VIH-séronégatifs Méthodes Deux doses de la protéine F recombinante, ou μg / dose, adjuvé avec AS ou reconstitué avec de l’eau pour injection, ont été administrées à des volontaires sains âgés de – F- Les réponses spécifiques des cellules T CD ont été mesurées en utilisant une coloration de cytokine intracellulaire après stimulation in vitro par des pools peptidiques chevauchants couvrant les antigènes individuels. Résultats La réactivité était plus élevée pendant la journée après chaque dose de vaccin dans les groupes adjuvés que dans les groupes non adjuvés. le taux de réponse immunitaire était élevé après la deuxième dose de vaccin, les taux e -μg Groupe F / AS% des antigènes du VIH et% de tous les antigènes du VIH Des fréquences élevées et persistantes de lymphocytes T CD ont été observées jusqu’à une valeur médiane de cellules T CD CD% spécifiques au jour, les réponses les plus fortes étant dirigées contre la transcriptase inverse Les lymphocytes T CD spécifiques d’antigène présentaient un phénotype polyfonctionnel, exprimant au moins le ligand CD et l’interleukine, souvent en combinaison avec le facteur de nécrose tumorale α et / ou l’interféron γ Les réponses des lymphocytes T CD induites par le vaccin étaient largement réactives à tous les antigènes dérivés de VIH-clades A et CConclusions Ces résultats soutiennent d’autres investigations cliniques de ce candidat vaccin anti-VIH à la fois dans un cadre prophylactique seul, en conjonction avec un antigène à base d’enveloppe ou en combinaison avec d’autres approches vaccinales dans un schéma primo-boost hétérologue. en tant que vaccin thérapeutique potentiellement modifiant la maladie chez les sujets infectés par le VIHNombre d’essais cliniques NCT

La mise au point d’un vaccin prophylactique sûr et efficace contre le virus de l’immunodéficience humaine (VIH) est une priorité mondiale en matière de santé Trois vaccins candidats contre le VIH ont été testés en phase IIb ou III Un vaccin à base de vecteurs adénoviraux et de prévention du VIH , mais une combinaison d’un vecteur poxvirus et de protéines gp recombinantes a récemment démontré une protection modeste Bien que l’objectif le plus souhaitable d’un vaccin anti-VIH reste la prévention de l’infection, un vaccin modificateur de la maladie. Le rôle des réponses des cellules T CD dans le contrôle des infections virales persistantes est bien établi Les cellules T CD spécifiques au virus jouent également un rôle central dans le contrôle immunitaire de nombreuses infections virales, y compris le VIH . Les cellules T CD sont nécessaires pour l’induction et le maintien des cellules T CD fonctionnelles , et la présence de polyfonctionnel et prolifération c Les lymphocytes T CD spécifiques du VIH chez les patients infectés par le VIH sont associés à une LTNP à long terme sans progression La perte de la prolifération des lymphocytes T CD spécifiques du VIH après une infection VIH aiguë peut être rétablie par le VIH induit par le vaccin. [1] Un candidat antérieur au vaccin anti-VIH comprenant gp et une protéine de fusion NefTat formulée dans des systèmes adjuvants immunostimulateurs propriétaires a suscité de fortes réponses de cellules T CD chez des adultes séronégatifs sains et chez les sujets infectés par le VIH recevant un traitement antirétroviral Sur la base de ces résultats et des résultats prometteurs avec le paludisme et les antigènes du virus de l’hépatite B recombinante, un système adjuvant à base de liposomes contenant du lipide -O-désacyl-monophosphoryle Un MPL et QS-ont été choisis pour une étude plus approfondie en raison de sa propension à induire une réponse plus forte des cellules T CD [,,] Parce que les réponses des lymphocytes T CD induite par le vaccin doivent couvrir le spectre le plus large possible de Les antigènes viraux contenant le plus grand nombre d’épitopes conservés sont les antigènes viraux Gag, Pol et Nef Compte tenu de leur rôle dans La pathogenèse du VIH et comme cibles pour les réponses des cellules T CD , p et p codées par gag, transcriptase inverse codée par pol, et la protéine régulatrice Nef ont été incluses comme une seule protéine de fusion F dans une nouvelle formulation de vaccin. évalué l’innocuité et l’immunogénicité de l’antigène de la protéine F adjuvanté avec de l’AS chez des volontaires VIH-séronégatifs sains

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Vaccin d’étude

Le vaccin candidat contre le VIH contenait, ou μg de protéine recombinante F par dose en tant qu’ingrédient actif, adjuvé avec AS ou reconstitué avec de l’eau pour injection. WFI F est une protéine de fusion recombinante exprimée chez Escherichia coli et comprenant des antigènes du clade B: p BH, RT HXB, Nef Bru-Lai et p BH L’antigène vaccinal a été préparé comme un culot lyophilisé contenant du F dans du saccharose, de l’acide éthylènediaminetétraacétique, de l’arginine, du polysorbate et du sulfite de sodium dans du tampon phosphate AS est un système adjuvant à base de liposomes de MPL et de μg de QS La fraction lyophilisée contenant l’antigène F et la fraction liquide constituée de AS ou WFI, toutes deux présentées dans un flacon de verre à dose unique -mL, ont été reconstituées par un vaccinateur sans insu, et mL du vaccin reconstitué solution injectée dans le muscle deltoïde du bras non dominant du sujet

Conception de l’étude et participants

Il s’agissait d’une étude de phase I / II, monocentrique, partiellement aveugle, en groupes parallèles avec un plan de dosage échelonné et échelonné. L’étude a été approuvée par le comité d’éthique indépendant local et a été menée conformément à la Déclaration d’Helsinki et de Good Clinical Directives de pratique, et tous les sujets ont fourni un consentement éclairé écrit Les participants étaient des hommes et des femmes adultes en bonne santé, âgés de – ans; à faible risque d’infection par le VIH; séronégatif pour les anticorps contre l’antigène nucléocapsidique de l’hépatite B, le virus de l’hépatite C, le VIH et le VIH et négatif pour l’antigène de surface de l’hépatite B et l’antigène p du VIH dans les échantillons sérologiques prélevés plusieurs semaines avant la vaccination. comme indiqué dans le registre ClinicalTrialsgovSubjects ont été randomisés: pour recevoir AS n = ou WFI n = pour chaque dose F, ou μg Les observateurs ont été aveuglés pour l’adjuvantation, mais pas pour la teneur en antigène Chaque sujet a reçu des doses de vaccin mois écart Les échantillons de sang ont été obtenus avant jour de vaccination, semaines jour et mois jour après la deuxième dose de vaccin, et mois jour et jour Tous les tests de laboratoire ont été effectués avec aveuglement

sécurité

La douleur, la rougeur, l’enflure et les symptômes généraux de la zone d’injection locale, la fatigue, les maux de tête, la transpiration, la myalgie et les symptômes gastro-intestinaux ont été notés sur les cartes journalières pendant plusieurs jours après chaque vaccination. ou gonflement & gt; mm, fièvre & g; ° C, et tout autre symptôme empêchant les activités quotidiennes normales Des symptômes non sollicités ont été enregistrés pendant des jours après chaque vaccination Des événements indésirables graves ont été enregistrés tout au long de l’étude

Réponses des lymphocytes T

Les réponses des cellules T ont été évaluées par coloration intracellulaire des cytokines après stimulation in vitro avec les pools de peptides p, p, RT et Nef pour évaluer l’expression de IL-, interféron IFN γ, facteur de nécrose tumorale TNF α et CD-ligand CDL avec adaptation d’une méthode précédemment décrite , utilisant des cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC isolées du sang veineux En bref, des PBMC décongelées ont été stimulées in vitro avec des pools de peptides -mer chevauchant les acides aminés Eurogentec couvrant les séquences du clade B p, p, RT, Après des heures à ° C, la brefeldine A a été ajoutée pour inhiber la sécrétion des molécules de signal pendant une incubation supplémentaire pendant la nuit. Les cellules ont été récoltées, colorées pour les marqueurs de surface CD et CD. , fixé, perméabilisé et coloré avec des anticorps marqués aux réactifs IL-, IFN-γ, TNF-α et CDL, l’analyse cytométrique BD Biosciences Flow a été réalisée avec un cytomètre de flux FACSCanto et FACSDiva Vers Logiciel BD Biosciences ou logiciel FlowJo Version Tree StarPour évaluer la réactivité croisée des cellules T CD induites par le vaccin avec des antigènes VIH non clade B, les PBMC collectées au bout de quelques jours et analysées pour l’expression de CDL et la production intracellulaire d’IL-, IFN-γ et TNF-a, en utilisant des pools peptidiques provenant des clades A p et p de TZA [Tanzanie]; RT et Nef de KE MSA [Kenya] et C ZM VIH-souches antigènes Clade B ont été inclus dans le même test que les contrôles Cette analyse exploratoire a été réalisée uniquement sur des échantillons de sujets dans le groupe F / AS-Ig. Utilisation du logiciel Clustal W Lasergene et Jalview Version Un sujet était considéré comme répondeur si ≥% de lymphocytes T CD spécifiques de l’antigène étaient observés après la soustraction du bruit de fond à la valeur maximale de tous les percentiles pour le pourcentage d’antigène spécifique. Cellules T CD exprimant des marqueurs ≥ avant la vaccination

Réponse immunitaire humorale

Les réponses des anticorps IgG anti-immunoglobuline G à F, p, p, RT et Nef ont été analysées en utilisant des tests immuno-enzymatiques standard internes. Les concentrations en anticorps ont été calculées en comparant la courbe dose-intervalle de l’échantillon analysé à celle d’un échantillon grain de beauté. échantillon de référence de la maison Tous les tests comprenaient des contrôles internes négatifs et positifs. Le seuil de séropositivité était ≥ mEU / mL pour p, ≥ mEU / mL pour p, ≥ MEU / mL pour RT, ≥ MEU / mL pour Nef, et ≥ MEU / mL pour F

Analyses statistiques

L’analyse de l’innocuité a été réalisée sur la cohorte vaccinée totale. Le nombre et le pourcentage de sujets signalant des symptômes locaux et généraux sollicités et / ou spontanés ont été calculés avec des intervalles de confiance exacts en%. L’analyse de l’immunogénicité a été effectuée sur des cohortes. des cellules T CD exprimant IL- et ≥ autre marqueur et le pourcentage de répondeurs après stimulation in vitro à chaque antigène individuel et à au moins,,, et tous les antigènes ont été déterminés à chaque point de temps La réponse des lymphocytes T CD spécifique F a été estimée de la somme des fréquences des lymphocytes T CD spécifiques en réponse à chaque antigène individuel dans les groupes adjuvés, les fréquences des lymphocytes T CD spécifiques à F semaines après la deuxième vaccination ont été comparées entre les doses par analyse de variance en utilisant les fréquences de log, avec dose ,, et μg inclus comme un effet fixe, suivi d’un ajustement de Tukey. Les comparaisons statistiques entre les groupes n’ont été effectuées à aucun moment. Les taux de séropositivité et les moyennes géométriques des anticorps ont été calculés avec% CI, en utilisant la méthode exacte des variables binomiales pour les taux de séropositivité et les antilogues des IC% des concentrations moyennes d’anticorps log-transformés pour les concentrations d’anticorps GMCs. en dessous du seuil de dosage ont été donnés une valeur arbitraire de la moitié de la coupure pour le calcul GMC

RÉSULTATS

Démographie

L’âge moyen d’écart type des participants à l’étude était les années,% étaient des femmes et% étaient blancs Aucune différence dans les données démographiques de base n’a été observée entre les groupes Tous les sujets ont reçu les deux doses vaccinales et ont terminé l’étude cohorte du protocole pour l’immunogénicité sujets compris% en mois et% en mois Figure

Figure Vue largeTélécharger la diapositiveConsort organigramme ATP, selon protocoleFigure Voir grandTélécharger la diapositiveConsort organigramme ATP, selon protocole

sécurité

La réactogénicité était plus élevée pendant la journée après chaque dose de vaccin dans les groupes F / AS que dans les groupes F / WFI. L’incidence des symptômes locaux et généraux avait tendance à être plus élevée dans les groupes F / AS après la deuxième dose de vaccin. le symptôme local sollicité le plus commun, rapporté après% -% des doses dans les groupes F / AS et après% -% des doses dans les groupes F / WFI grade gravité après% -% des doses dans les groupes F / AS Fatigue était le Symptômes généraux les plus fréquemment sollicités, rapportés après% -% et% -% des doses dans les groupes F / AS et F / WFI, respectivement grade de sévérité après -% des doses dans les groupes F / AS Aucune fièvre n’a été rapportée après la première doses de vaccin dans les groupes F / AS Une fièvre de grade a été rapportée après% -% des secondes doses vaccinales dans les groupes F / AS Aucun symptôme local ou général indésirable n’a été rapporté dans les groupes F / WFI Aucune différence de réactogénicité n’a été observée entre les antigènes les niveaux de dose dans les groupes F / AS

Figure View largeTélécharger la lameIncidence des symptômes locaux et généraux sollicités et de toute gravité au cours de la journée après chaque dose de vaccin Symptômes locaux sollicités site d’injection douleur, rougeur, gonflement et symptômes généraux fatigue, fièvre, gastro-intestinal [par ex. Nausées, vomissements, diarrhée, et la douleur abdominale], les maux de tête, la myalgie et les symptômes de sudation ont été enregistrés sur les cartes journal pendant les jours après chaque dose de vaccin. La sévérité des symptômes a été évaluée sur une échelle de -, avec des symptômes de type rouge ou enflure. mm de diamètre, fièvre & g; ° C, et tout autre symptôme empêchant les activités quotidiennes normalesFigure View largeTélécharger DiapositiveIncidence des symptômes locaux et généraux sollicités et de toute gravité pendant la journée après chaque dose de vaccin Sollicités symptômes locaux site d’injection douleur, rougeur, gonflement symptômes généraux: fatigue, fièvre, troubles gastro-intestinaux (c.-à-d. nausées, vomissements, diarrhée et douleurs abdominales), céphalées, myalgies et transpiration ont été consignés sur des cartes journalières pendant des jours après chaque dose de vaccin. symptômes de grade définis comme une rougeur ou un gonflement & gt; mm de diamètre, fièvre & g; ° C, et tout autre symptôme empêchant les activités quotidiennes normalesDurant la journée post-vaccination,% -% des sujets des groupes F / AS ont signalé des symptômes non sollicités, comparé à% -% dans les groupes F / WFI Dans les groupes F / AS, les symptômes spontanés principalement les frissons et les réactions au site d’injection étaient considérés comme causalement liés à la vaccination chez% -% des sujets et étaient de grade ≤% Tous les symptômes apparentés étaient transitoires et résolus sans séquelles, généralement en six jours. des événements indésirables graves ont été signalés dans les groupes F / AS, tous considérés comme non liés à la vaccination Aucun sujet n’est décédé pendant la période d’étude, et aucun sujet ne s’est retiré en raison d’événements indésirables

Réponses de cellules T CD contre des antigènes homologues

Dans tous les groupes non adjuvés, la fréquence des lymphocytes T CD spécifiques à l’antigène exprimant ≥ les marqueurs immunitaires incluant IL- était inférieure ou proche des valeurs seuils du test non montrées. Des taux très élevés de répondeurs ont été observés dans tous les groupes F / AS plusieurs semaines après la deuxième dose. Le nombre de répondeurs était le plus élevé dans le groupe F / AS de -μg, tous les sujets répondant à ≥ antigènes et% à tous les antigènes pour le moment. Les réponses dans le groupe F / AS -μg étaient larges et dirigées contre tous les antigènes vaccinaux, avec les taux de réponse les plus élevés à l’antigène RT Les réponses des lymphocytes T CD induites par le vaccin ont duré longtemps, avec% de sujets dans le groupe F / AS -μg encore répondre aux antigènes,% aux antigènes, et% aux antigènes au jour de la réponse pour la protéine de fusion F était significativement plus grande dans le groupe F / AS -μg P & lt; La réponse à la protéine de fusion F induite dans le groupe F / AS-μg était encore observable à un mois Figure Dans ce groupe, la fréquence médiane des cellules T CD spécifiques à F produisant IL- et ≥ d’autres marqueurs a atteint un pic à presque% le jour et a été maintenu à% au mois

Tableau CD Réponse des lymphocytes T au vaccin antiamaril à adjuvant de type F / AS Candidat Vaccin Candidat: Taux de réponse a Point F Temps, μg Sujets, Nob répondeurs par Nombre d’antigènes IC%,% répondeurs par CI antigène,% ≥ antigène ≥ antigènes ≥ antigènes Tous les antigènes Nef p p RT Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Point de temps F Dose, μg Sujets, Non b Répondeurs par Nombre d’antigènes% IC,% Répondeurs par antigène% IC,% ≥ antigène ≥ antigènes ≥ antigènes Tous les antigènes Nef p p RT Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Jour – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – Les réponses cellulaires ont été évaluées par coloration intracellulaire des cytokines après stimulation par p, p, transcriptase inverse RT, et Pools de peptides Nef Les résultats ont été exprimés en pourcentage du cellules T CD totales exprimant l’interleukine et ≥ l’autre interféron marqueur γ, le facteur de nécrose tumorale α ou le ligand CD Un sujet était considéré comme répondeur si la réponse CD antigène spécifique était ≥%, la valeur seuil CI, intervalle de confiancebSubjects avec résultats disponibles

Figure Vue largeDownload slidePercentage des lymphocytes T CD exprimant interleukine IL et ≥ autre marqueur en réponse à la réponse de la protéine de fusion F La réponse des lymphocytes T CD spécifiques a été estimée à partir de la somme des fréquences spécifiques des lymphocytes T CD en réponse à chaque antigène individuel. en tant que pourcentage des lymphocytes T CD totaux exprimant IL- et ≥ autre interféron marqueur γ, facteur de nécrose tumorale α, ou ligand CD * P & lt; au jour pour μg par rapport aux deux groupes et μg; Des comparaisons statistiques entre les groupes n’ont pas été réalisées à un autre moment. WFI, eau pour injection Figure 1: Doppler des cellules T CD exprimant l’interleukine IL et ≥ d’autres marqueurs en réponse à la réponse les fréquences des lymphocytes T CD spécifiques en réponse à chaque antigène individuel Les résultats ont été exprimés en pourcentage de cellules T CD totales exprimant IL- et ≥ autre interféron marqueur γ, facteur de nécrose tumorale α ou ligand CD * P & lt; au jour pour μg par rapport aux deux groupes et μg; Des comparaisons statistiques entre les groupes n’ont pas été réalisées à un autre moment. WFI, eau pour injection Les lymphocytes T CD induits par le vaccin présentaient un phénotype polyfonctionnel Figure a La majorité des lymphocytes TCD CDL spécifiques F produisent IL- seul ou en combinaison avec TNF-α et / ou IFN-γ Environ% de lymphocytes TCD CDL spécifiques de F sécrétaient ≥ des cytokines, et ce profil de coexpression des cytokines a été maintenu jusqu’au mois Figure b Un profil similaire a été observé pour tous les antigènes individuels données non montrées

Vue de la figure largeDownload, Profil de coexpression de cytokines des lymphocytes T CDCDL spécifiques de F dans le groupe F / AS -μg semaines après le deuxième jour de dose B, Diagrammes circulaires pour tous les points temporels du groupe F-AS F-AS Les réponses des cellules T ont été estimées à partir de la somme des fréquences spécifiques des lymphocytes T CD en réponse à chaque antigène individuel. Les résultats ont été exprimés en pourcentage du nombre total de lymphocytes CDCDL exprimant, ou cytokines interleukine [IL], facteur de nécrose tumorale [TNF] α ou interféron [IFN] γ Les diagrammes à secteurs représentent les pourcentages en proportions Les valeurs à la journée étaient inférieures ou égales aux données de coupure du test non montréesFigure Vue largeDownload, Profil de coexpression des cytokines des lymphocytes T CDCDL spécifiques à F dans le groupe F / AS-μg à semaines après le deuxième jour de dose B, diagrammes à secteurs pour tous les points temporels dans la réponse des lymphocytes T CD spécifiques du groupe F / AS F ont été estimés à partir de la somme des fréquences spécifiques des lymphocytes T CD en réponse à chaque antigène individuel. comme le pourcentage des lymphocytes T CDCDL totaux exprimant, ou des cytokines interleukine [IL], facteur de nécrose tumorale [TNF] α, ou interféron [IFN] γ Les diagrammes à secteurs représentent des pourcentages en proportions Les valeurs à la journée étaient inférieures ou proches des valeurs seuils pas montré

Réponses de cellules T CD contre les antigènes hétérologues

Dans le groupe F / AS -μg, les réponses des lymphocytes T CD spécifiques du VIH à la journée étaient inférieures ou proches de la valeur seuil pour tous les antigènes dans toutes les données de clades non montrées Réponses de lymphocytes T CD faiblement réactives à p, p, RT, L’amplitude de la réponse des lymphocytes T CD spécifiques du VIH contre les peptides des clades A et C était environ la moitié de celle observée avec les peptides clade B correspondants dans tous les antigènes. L’analyse de l’alignement a révélé% -% identité entre les antigènes F du clade B et les autres clades Tableau Tous les sujets ont monté une réponse à RT et p des clades A et C en accord avec les taux de réponse élevés aux antigènes homologues du clade B correspondants.

Tableau Réactivité croisée des réponses des lymphocytes T CD contre les antigènes du clade du VIH, Nob répondeurs% CI, c% de cellules CDT exprimant l’IL- et ≥ l’autre identité d’acide aminé Markerd avec l’antigène vaccinal,% p B – A – C – RT B – A – C – Nef B – A – C – p B – A – C – Antigène VIH – Clade Subjects, Nob répondeurs% CI, c% CD T Cellules exprimant IL- et ≥ Autre identité d’acide aminé Markerd avec l’antigène vaccinal,% p B – A – C – RT B – A – C – Nef B – A – C – p B – A – C – aLes données comprennent le pourcentage de répondeurs à quelques semaines après le deuxième jour de dose dans le groupe μg F / AS Sang périphérique cellules mononucléaires recueillies au jour et ont été analysés par la coloration des cytokines intracellulaires pour l’expression du ligand CDL et de la production d’interleukine IL, interféron IFN γ et TNFα, en utilisant des pools peptidiques des clades B, A p et p de Tanzanie, de la transcriptase inverse et du Nef du Kenya, et du virus de l’immunodéficience humaine de type C ZM Souches VIH Les résultats ont été exprimés en pourcentage de cellules T CD totales exprimant IL- et au moins un autre marqueur IFN-y, TNF-a ou CDL A a été considéré comme répondeur si la réponse CD spécifique de l’antigène était ≥% , la valeur de coupurebSubjects avec les résultats disponiblescCI, intervalle de confianced’autres répondeurs, le pourcentage médian de cellules T CD exprimant IL- et ≥ autre marqueur IFN-γ, TNF-α, ou CDLView Large

Figure View largeTélécharger la diapositive Réactivité croisée des réponses des cellules T CD quelques semaines après le deuxième jour de dose dans le groupe F / AS -μg chez les répondeurs Les cellules mononucléaires du sang périphérique collectées au jour et chez les sujets du groupe F / AS -μg ont été analysées par coloration des cytokines intracellulaires pour l’expression du CDL ligand CDL et production d’interleukine IL, interféron IFN γ, et TNF α du facteur de nécrose tumorale, en utilisant des pools peptidiques des clades B, A p et p de Tanzanie, transcriptase inverse [RT] et Nef du Kenya Les résultats ont été exprimés en pourcentage du nombre total de lymphocytes T CD exprimant IL- et ≥ d’autres marqueurs. Les valeurs IFN-γ, TNF-α ou CDL au jour étaient inférieures ou proches du test. coupure contre chaque antigène pour tous les clades données non montréesFigure vue largeDiagnostic de la réactivité croisée des lymphocytes T CD semaines après le deuxième jour de dose dans le groupe F / AS -μg parmi les répondeurs Mononucléaires du sang périphérique c ont été analysés par coloration intracellulaire des cytokines pour l’expression du CDL ligand CDL et la production d’interleukine IL, interféron IFN γ, et le facteur de nécrose tumorale TNF α, en utilisant des pools de peptides de clades B, A p et p de Tanzanie, transcriptase inverse [RT] et Nef du Kenya, et souches de VIH de type virus de l’immunodéficience humaine C ZM Les résultats ont été exprimés en pourcentage du nombre total de lymphocytes T CD exprimant IL- et ≥ Les valeurs de γ, de TNF-α ou de CDL à la journée étaient inférieures ou égales à la valeur seuil de l’essai pour chaque antigène pour toutes les données de clades non montrées

Réponses des lymphocytes T CD

Les cellules T CD induites par un vaccin n’ont pas été détectées par des données de coloration de cytokines intracellulaires non montrées.

Réponses immunitaires humorales

Tous les sujets ont été séroconvertis à F dans les groupes avec adjuvant, avec des concentrations d’IgG similaires pour toutes les doses qui ont persisté jusqu’au mois où les anticorps IgG ont été déclenchés contre tous les antigènes individuels. Des réponses immunitaires humorales très faibles ont été induites dans les groupes non adjuvés

Figure View largeTélécharger la diapositive Réponse immunitaire humorale contre la protéine de fusion F Les concentrations d’anticorps IgG anti-F immunoglobuline G ont été mesurées par dosage immuno-enzymatique et exprimées en concentrations géométriques moyennes GMCs en mEU / mL La valeur seuil de F était ≥ mEU / mL WFI, Les immunoglobulines anti-F ont été mesurées par dosage immuno-enzymatique et exprimées en tant que concentrations moyennes géométriques GMC en mEU / mL. La valeur seuil de F était ≥ mEU / mL WFI, eau pour injection

DISCUSSION

NefTat, vaccin anti-VIH , antigène de surface recombinant de l’hépatite B , antigènes de Plasmodium falciparum RTS, S et Mycobacterium tuberculosis Le vaccin F / AS a provoqué une fréquence élevée de lymphocytes T polyfonctionnels Le taux global de répondeurs était élevé dans tous les groupes de vaccins avec adjuvant, avec des réponses déclenchées contre tous les antigènes vaccinaux. Cependant, les réponses les plus puissantes des lymphocytes T CD ont été observées dans le groupe ayant reçu la plus faible dose d’antigène. Le vaccin candidat AS a été séroconverti en antigène F, aucune différence significative dans les réponses anticorps n’a été observée entre les groupes de doses. Cela pourrait indiquer des différences importantes dans l’induction des réponses des lymphocytes T par rapport aux lymphocytes B par le candidat vaccin. le rapport de l’adjuvant à la dose d’antigène, une hypothèse méritant une exploration plus poussée dans des études futures. Les lymphocytes T CD induits par le vaccin expriment CDL et produ ced IL- seule ou en combinaison avec TNF-α et / ou IFN-γ Ceci est une observation importante et prometteuse, car les cellules T CD antivirales produisant plusieurs cytokines sont considérées comme fonctionnellement supérieures à celles produisant des cytokines uniques , et leur association avec le LTNP L’infection par le VIH est bien établie Des lymphocytes T CD polyfonctionnels spécifiques du virus se sont révélés importants pour l’immunité protectrice chez les singes vaccinés après une provocation par le virus de l’immunodéficience simienne. Cependant, les réponses vigoureuses des lymphocytes T CD induites peuvent être en mesure de fournir l’aide nécessaire aux cellules T CD induites par d’autres stratégies vaccinales, telles que les vecteurs vivants lorsqu’ils sont combinés dans un régime de primo-immunisation . est la diversité du virus VIH dans le monde, nécessitant l’induction d’une réponse immunitaire largement réactive croisée Le vaccin F / AS, comprenant uniquement les antigènes clade B, était abl e pour obtenir des réponses de lymphocytes T CD largement réactives à tous les antigènes dérivés des clades A et CA bien que ces résultats soient encourageants, un inconvénient potentiel d’un vaccin induisant des cellules T CD est le fait que le VIH infecte préférentiellement les cellules T CD activées, en particulier. Cellules T CD spécifiques au VIH Comme tout candidat vaccin anti-VIH dépendra éventuellement d’un certain degré d’induction des lymphocytes T CD pour une réponse immunitaire antivirale efficace, il peut être important d’évoquer des niveaux élevés de cellules T CD pour faire pencher la balance. faveur du système immunitaire Il est rassurant de constater que la plupart des vaccins sont systématiquement administrés à des patients infectés par le VIH sans aucun problème de sécurité ou effet négatif cliniquement significatif sur la progression de la maladie ou la charge virale malgré leur activation ou leur induction. l’étude d’un vaccin anti-VIH à base d’adénovirus recombinant trivalent n’indique aucune corrélation entre le niveau de lymphocytes T CD activés et une susceptibilité accrue à l’infection par le VIH. r En conclusion, les résultats de cette étude montrent que le vaccin anti-VIH avec adjuvant F / AS est immunogène avec un profil de sécurité acceptable. T CD forte, polyfonctionnelle, largement réactive et persistante. Les propriétés de la réponse immunitaire suggèrent que ce candidat vaccin mérite une évaluation plus approfondie, à la fois dans un contexte prophylactique seul, en conjonction avec un antigène à base d’enveloppe, ou en combinaison avec d’autres vaccins. des approches dans un régime hétérologue de rappel et en tant que vaccin thérapeutique potentiellement modifiant la maladie chez des sujets infectés par le VIH; Une étude clinique sur ces sujets a été initiée. NCT Nous remercions tous les participants aux essais et reconnaissons les contributions des cliniciens, infirmières et techniciens de laboratoire du Centre for Vaccinology, Université de Gand et Hospital Conflits d’intérêts potentiels. une variété de candidats vaccins pour Baxter, GlaxoSmithKline Biologicals, Novartis et SanofiPasteur et a également effectué des services de consultation pour GlaxoSmithKline Biologicals et Novartis PB, MK, MJ, IC, AC, MAD, GV et LM étaient tous des employés de GSK Biologicals à la temps de l’étude L’université de Gand et l’hôpital universitaire ont reçu le sponsor pour la conduite de ces études EVB et FC rapportent aucun conflit Soutien financier GlaxoSmithKline GSK Biologicals, Rixensart, Belgique était le commanditaire d’étude et était responsable de l’administration de l’étude comprenant la gestion d’approvisionnement d’essai clinique, laboratoire essais, coordination d’études et analyses statistiques E De Kock et Evi De Ruymaeker étaient responsables de la gestion des études, et Fabienne Douaud a dirigé la gestion des données et le nettoyage. Jennifer Coward, Veronique Delpire et Ulrike Krause, pour le compte de GSK Biologicals |

Un homme âgé de fièvre et de polyarthralgie